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          天津本生闡述:甘油三酯(TG)檢測(cè)試劑盒
          更新時(shí)間:2022-12-13瀏覽:1017次

          甘油三酯(TG)檢測(cè)試劑盒

          PS1087 甘油三酯(TG)檢測(cè)試劑盒 GPO-PAD單試劑微板法 (psaitong)保存條件:-20℃ 避光 6個(gè)月
          產(chǎn)品簡(jiǎn)介

          甘油三酯(Triglyceride,TG)又稱(chēng)三酰甘油,是3分子長(zhǎng)鏈脂肪酸和甘油形成的脂肪分子,是人體內(nèi)含量最多的脂類(lèi),大部分組織均可以利用甘油三酯分解產(chǎn)物供給能量,同時(shí)肝臟、脂肪等組織還可以進(jìn)行甘油三酯的合成,用酶學(xué)方法測(cè)定 TG 是生化檢測(cè)中的常用方法, 其特點(diǎn)是:1、靈敏度、準(zhǔn)確度、精密度均高;2、使用溫和的反應(yīng)條件;3、操作簡(jiǎn)便;4、適用于自動(dòng)分析儀。
          本公司甘油三脂(TG)檢測(cè)試劑盒(GPO-PAP 單試劑微板法)又稱(chēng)磷酸甘油氧化酶法或磷酸甘油氧化酶-過(guò)氧化物酶偶聯(lián)法等,其原理是甘油三脂被 LPL 水解為甘油和脂肪酸,后者經(jīng)甘油激酶和 ATP 磷酸化,G-3-P 被磷酸甘油氧化酶(GPO)氧化并產(chǎn)生過(guò)氧化氫,再經(jīng)過(guò)氧化物酶(POD)催化,使 4-氨基安替比林與酚(三者合稱(chēng) PAP)反應(yīng),生成紅色benhun醌亞胺(Trinder 反應(yīng)),酶標(biāo)儀在 500~520nm 處進(jìn)行比色測(cè)定,用于人或動(dòng)物的血清、血漿、腦脊液、細(xì)胞、組織等樣本中的甘油三脂含量定量測(cè)定。該試劑盒僅用于科研領(lǐng)域,不適用于臨床診斷或其他用途。

          組分:

          名稱(chēng)規(guī)格儲(chǔ)存
          試劑(A): GPO-PAP工作液Good's Buffer

          30mL


          -20℃ 避光
          LPL、GK、GPO
          過(guò)氧化物酶(POD)
          4-氨基安替比林
          對(duì)氯酚
          試劑(B): Glycerol 標(biāo)準(zhǔn)(1.7mmol/L)1mL4℃ 避光
          試劑(C): ddH2O1mLRT


          自備材料:

          1、生理鹽水或PBS。
          2、96 孔板或離心管、小試管。
          3、水浴鍋或恒溫箱。
          4、酶標(biāo)儀或分光光度計(jì)。
          5、全自動(dòng)或半自動(dòng)生化分析儀。


          操作步驟(僅供參考)

          一、樣本處理
          1、血清、血漿、腦脊液樣本:從待測(cè)樣本中分離出的血清或血漿不應(yīng)有溶血,直接檢測(cè),如超過(guò)線性范圍,用生理鹽水稀釋后檢測(cè)。
          2、細(xì)胞樣本
          a:取適量的細(xì)胞(一般推薦>106以上),1000g離心10min,棄上清,留取沉淀。
          b:.用 PBS 或生理鹽水清洗 1-2 次,1000g離心10min,棄上清,留取沉淀。
          c:加入200-300μl 的PBS或生理鹽水勻漿,冰浴條件下超聲破碎細(xì)胞,功率300W,每次3-5s,間隔30s,重復(fù)3-5次;亦可手動(dòng)勻漿,制備好的勻漿液不可離心;亦可用1-2% Triton X-100 冰浴 30-60min,制備好的裂解液不可離心。
          3、組織樣本:準(zhǔn)確稱(chēng)取適量組織樣本,按質(zhì)量(g):生理鹽水或PBS(mL)=1:9的比例,加入生理鹽水或PBS,冰浴條件下手動(dòng)或機(jī)械勻漿,2500-3000g 離心10min,取上清待用。
          二、酶標(biāo)儀TG測(cè)定操作:
          1:按下表依次加入試劑:
          加入物(μL)空白孔標(biāo)準(zhǔn)孔待測(cè)孔
          ddH2O3--
          Glycerol 標(biāo)準(zhǔn)(1.7mmol/L)-3-
          待測(cè)樣本--3
          GPO-PAP 工作液300300300
          2:充分混勻, 37℃水浴中孵育5min。
          3:酶標(biāo)儀測(cè)定 500-520nm 吸光度,以空白孔調(diào)零,讀取標(biāo)準(zhǔn)孔和各待測(cè)孔的吸光度。
          三、分光光度計(jì)(1ml 比色杯)、半自動(dòng)生化分析儀 TG 測(cè)定操作:
          1、按下表依次加入試劑:
          加入物(mL)空白管標(biāo)準(zhǔn)管待測(cè)管
          ddH2O0.01--
          Glycerol 標(biāo)準(zhǔn)(1.7mmol/L)-0.01-
          待測(cè)樣本--0.01
          GPO-PAP 工作液111
          2、充分混勻, 37℃水浴中孵育5min。
          3、分光光度計(jì)測(cè)定500-520nm吸光度,空白管調(diào)零,讀取標(biāo)準(zhǔn)管和各待測(cè)管的吸光度。
          四、普通分光光度計(jì)(2mL比色杯)TG 測(cè)定操作:
          1、按下表依次加入試劑:
          加入物(mL)空白管標(biāo)準(zhǔn)管待測(cè)管
          ddH2O0.02--
          Glycerol 標(biāo)準(zhǔn)(1.7mmol/L)-0.02-
          待測(cè)樣本--0.02
          GPO-PAP 工作液222
          2、充分混勻, 37℃水浴中孵育5min。
          3、分光光度計(jì)測(cè)定500-520nm吸光度,空白管調(diào)零,讀取標(biāo)準(zhǔn)管和各待測(cè)管的吸光度。
          五、全自動(dòng)生化分析儀 TG 測(cè)定操作:
          1、按下表依次加入試劑:
          加入物((μL)空白管標(biāo)準(zhǔn)管待測(cè)管
          ddH2O3--
          Glycerol 標(biāo)準(zhǔn)(1.7mmol/L)-3-
          待測(cè)樣本--3
          GPO-PAP 工作液300300300
          2、充分混勻, 37℃水浴中孵育5min。
          3、全自動(dòng)生化分析儀測(cè)定 500-520nm 波長(zhǎng)處吸光度,以空白管調(diào)零,讀取標(biāo)準(zhǔn)管和各待測(cè)管的吸光度。


          機(jī)器參數(shù):

          主波長(zhǎng)/次波長(zhǎng)500/600nm
          反應(yīng)類(lèi)型終點(diǎn)法
          反應(yīng)方向升反應(yīng)(+)


          計(jì)算公式:

          血清、血漿等液體樣本(空白調(diào)零):
          TG(mmol/L)={(待測(cè)管吸光度-空白吸光度)/(標(biāo)準(zhǔn)管吸光度-空白吸光度)}×1.7mmol/L
          血清、血漿等液體樣本(全自動(dòng)生化分析儀):
          TGmmol/L)=(待測(cè)管吸光度/(標(biāo)準(zhǔn)管吸光度)×1.7mmol/L
          細(xì)胞、組織等樣本(空白調(diào)零):
          TG(mmol/L)={ ( 待 測(cè) 管 吸 光 度 - 空 白 吸 光 度 )/( 標(biāo) 準(zhǔn) 管 吸 光 度 -空 白 吸 光 度 ) }×1.7mmol/L÷待測(cè)樣本濃度(mg/mL)
          細(xì)胞、組織等樣本(全自動(dòng)生化分析儀):
          TG(mmol/L)=(待測(cè)管吸光度/(標(biāo)準(zhǔn)管吸光度)×1.7mmol/L÷待測(cè)樣本濃度(mg/mL)


          參考區(qū)間:

          健康成年人:
          理想范圍:<1.7mmol/L(<150mg/dl)
          邊緣升高:<1.7-2.25mmol/L(150-199mg/dl)
          升高:<2.26-5.64mmol/L(200-499mg/dl)
          很高:≥565mmol/L(500mg/dl)


          性能指標(biāo):

          外觀無(wú)色至淡黃色澄清液體
          線性范圍0.05-9.0mmol/L(4~790mg/dl),R2>0.98
          靈敏度檢測(cè)下限 0.05mmol/L(4mg/dl)
          變異系數(shù)批內(nèi)<5%,批間<8%,總誤差<10%
          空白吸光值 <0.2(1cm 光徑)
          干擾因素膽紅素<205μmol/L;血紅蛋白<6g/L;EDTA、肝素抗凝時(shí),對(duì)結(jié)果無(wú)明顯影響。
          穩(wěn)定性密閉,6個(gè)月


          注意事項(xiàng):

          1、上述低溫試劑避免反復(fù)凍融,以免失效或效率下降。
          2、本法可直接用于檢測(cè)腦脊液中的TG含量,但不能直接檢測(cè)尿液中的TG含量,因?yàn)槲唇?jīng)處理的尿液中含有還原性物質(zhì),影響過(guò)氧化物酶反應(yīng)。
          3、待測(cè)樣本如不能及時(shí)測(cè)定,應(yīng)置于2-8℃保存,3天內(nèi)穩(wěn)定。
          4、本法線性范圍可達(dá)9.0mmol/L,如果樣本TG濃度過(guò)高,結(jié)果可能呈假性降低,應(yīng)用生理鹽水稀釋后重測(cè),結(jié)果乘以稀釋倍數(shù)。


          有效期:-20℃ 避光, 6個(gè)月有效。



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